Skip to content

Monokarboksylan Transporter 1 Wykorzystanie niedoboru i ketonów AD 3

1 miesiąc ago

730 words

Żadna z tych mutacji nie była wcześniej widoczna w bazujących na populacjach bazach danych zmienności (1000 genomów, dbSNP, NHLBI GO Genome Sequencing Project Exome Variant Server i Genome of the Netherlands) 12. Wszystkie dane genetyczne wiążą defekty MCT1 z kwasicą ketonową w naszym pacjenci. Wyrażenie MCT1
Następnie badaliśmy wpływ mutacji w MCT1 na poziomie białka. Analiza immunoblotów z użyciem homogenatów fibroblastów od pacjentów z homozygotyczną mutacją MCT1, przeprowadzonych z przeciwciałami skierowanymi przeciwko C-terminalnemu peptydowi MCT1, potwierdziła, że przewidywane mutacje powodujące skrócenie prowadzą do braku białka pełnej długości (ryc. S1A w dodatku uzupełniającym) . U pięciu pacjentów mogliśmy wykryć tylko jedną heterozygotyczną mutację skracającą w MCT1 (Figura 1A), pomimo sekwencjonowania całego regionu kodującego. Analiza potwierdzonej cDNA ekspresji biallelicznej (Figura 1B). Specjalna analiza ilościowa amplifikacji po amplifikacji dodatkowo wykluczyła obecność delecji o wielkości egzonów u pacjentów heterozygotycznych. Analiza immunoblotów wykazała znacząco obniżone poziomy białka MCT1 w fibroblastach od pacjentów z heterozygotyczną mutacją ścinającą, w stosunku do poziomów w kontrolach (Figura 1C i Fig. S1B w Dodatku Uzupełniającym). Wyniki testu immunoblot potwierdziły, że istnieje niedobór MCT1 na poziomie białka. Przetestowaliśmy fibroblasty, aby określić, czy niedobór MCT1 został skompensowany przez zwiększoną komórkową ekspresję MCT4, ale nie znalazł na to żadnego dowodu (ryc. S1C w dodatku uzupełniającym).
Test transportu monokarboksylanu
Następnie badaliśmy wpływ mutacji w MCT1 na transport monokarboksylanu, stosując wcześniej opisany test na aktywność MCT1, który mierzy wypływ mleczanu z erytrocytów endogennie obciążonych mleczanem.6,13 W próbkach od pacjentów z homozygotyczną mutacją w MCT1, mleczan erytrocytów transport był znacznie zmniejszony w porównaniu z próbkami kontrolnymi (Figura 1D). Średnia aktywność transportowa mleczanu w erytrocytach pochodzących od nosicieli heterozygotycznych, zarówno objawowych, jak i bezobjawowych, była znacząco zmniejszona w porównaniu z aktywnością transportową w próbkach kontrolnych, ale była znacznie wyższa niż u pacjentów homozygotycznych (ryc. 1D).
Objawy kliniczne
Rysunek 2. Rysunek 2. Wyniki badań krwi od pacjentów z niedoborem MCT1. Panel A pokazuje pH krwi w czasie dla indeksu pacjenta (który miał mutację p.Asp15fs). Zdarzenia ketoacidotyczne są wyraźnie widoczne. Rozszerzony opis przypadku dla tego pacjenta jest dostępny w Dodatku Uzupełniającym. Panel B pokazuje poziomy 3-.-hydroksymaślanu w moczu, znormalizowane do kreatyniny, u trzech pacjentów z niedoborem MCT1. Wartości kontrolne są mniejsze niż 10 mmol na mol kreatyniny pomiędzy epizodami i między 160 a 6400 mmol na mol kreatyniny po 24 godzinach poszczenia. Panel C pokazuje nadmiar dwutlenku węgla (rzeczywiste stężenie dwutlenku węgla minus oczekiwane stężenie dwutlenku węgla) w porównaniu z pH u pacjentów homozygotycznych lub heterozygotycznych z niedoborem MCT1 i kontrolą. Oczekiwane stężenie dwutlenku węgla obliczono zgodnie ze wzorem Wintera; pozioma przerywana linia wskazuje na brak nadmiaru dwutlenku węgla. Punkty danych dla pacjenta indeksu wyraźnie pokazują, że wartości krwi mieściły się w normalnym zakresie, z wyjątkiem zdarzeń ketotycznych. Wartości podczas ketotycznego zdarzenia u pacjenta z mitochondrialnym niedoborem acetoacetyl-CoA tiolazy (ACAT1) stanowią odrębną konstelację od wartości dla pacjentów z niedoborem MCT1. Panel D pokazuje najniższą zarejestrowaną wartość pH krwi podczas zdarzenia ketotycznego u pacjentów homozygotycznych i heterozygotycznych z niedoborem MCT1 i kontrolą. Poziomy pasek wskazuje średnią wartość kontrolną. Wartość pH jest niższa u pacjentów homozygotycznych i heterozygotycznych niż u osób z grupy kontrolnej, a niższa u homozygotów niż u heterozygot.
Wszyscy pacjenci zgłaszali się z napadami kwasicy ketonowej wywołanymi przez post lub infekcje w pierwszym roku życia (Tabela 1), jak to pokazano dla pacjenta indeksu na Figurze 2A, i Figura S2A w Dodatku Uzupełniającym. PH krwi było normalne między epizodami. W takich okolicznościach wydzielanie ketonów w moczu mieściło się w zakresie od normy do wyraźnie podwyższonego (ryc. 2B). Epizody ketaksydotyczne były poprzedzone złym żywieniem i wymiotami i wiązały się z odwodnieniem, które było następstwem diurezy osmotycznej i wymiotów. Hipoglikemię obserwowano rzadko, a stężenie glukozy zwykle pozostawało w zakresie prawidłowym (ryc. S2B i S2C w dodatkowym dodatku). U niektórych pacjentów powtarzające się wymioty doprowadziły do rozpoznania ketotycznych wymiotów lub migreny brzusznej
[więcej w: olej makadamia, kwas hialuronowy, olejek moringa ]

Powiązane tematy z artykułem: kwas hialuronowy olej makadamia olejek moringa